Mikroskopische Färbemethoden                  Zoologie

Bemerkung :
Fixierung in Formaldehydlösg. 4%ig (mind. 5 Tage) oder besser in Formalin-Alkohol (96%iger Ethanol + Formaldehydlösg. 4%ig zu gleichen Teilen) mind. 12 Tage
2-3 Tage vor dem Einbetten oder Schneiden, in 4%iges Formalin übertragen. (Das Material sollte nicht älter als 3 Jahre sein)

Literatur :  
HistTech S.124, MT48 §1848, MT68 §1888, MT89 S.598

Arbeitsablauf :
1. Schnitte entparaffinieren und in 50%igen Ethanol bringen.
   Gefrierschnitte für mindestens 15 Min. in 50%iges Ethanol bringen.
2. Aufziehen der Schnitte auf den Objektträger und Abtrocknen mit einer Lage Filtrierpapier.
3. Übertragen in die Schnittbeize    3 Min.
4. Objektträger mit einem Tupfer sorgfältig trockenwischen, so daß nur noch der Schnitt und dessen Umgebung (wie sie dem aufgesetzten Deckglas entspricht) feucht bleibt.
5. 2-3 maliges Abtupfen des noch feuchten Schnittes mit Alkohol-Chloroform durchtränktem Filtrierpapier.
6. Schnitte mit Alkohol-Chloroform bedecken, WARTEN.
   Ein Eintrocknen der Schnitte durch Verdunsten der Flüssigkeit ist dabei peinlichst zu vermeiden.
7. Sobald die graue und weiße Substanz in der Aufsicht gleichmäßig erscheinen, Farblösung mit einer Pipette auftropfen.    5-10 Sek.
   Nicht mehr Farblösung auftropfen als eben zum Bedecken des Schnittes notwendig ist.
8. Abspülen der Farblösung mit 10%iger Kaliumbromidlösung.
   Man spritzt die Kaliumbromidlösung so lange auf den schräg gehaltenen Objekträger, bis das gleich zu Anfang entstehende, grünlich metallisch glänzende Farbhäutchen völlig entfernt ist, und das Präparat gleichmäßig samtartig schwarzblau aussieht. Andernfalls bekommt man im fertigen Präparat sehr störende Farbniederschläge.
9. Schnitt mit Filtrierpapier abpressen.
10. Differenzieren mit Anilin-Chloroform, sobald die milchige Trübung verschwunden ist (Sekunden bis mehrere Minuten) mit Xylol unterbrechen.
11. Den Schnitt mit Xylol mehrmals übergießen, abtupfen mit Filtrierpapier.
12. Xylol, Einschlußharz

Ansätze :
• Schnittbeize : Mischung aus 1 Teil 0.5%iger Phosphormolybdänsäure und 3 Teilen 96%igem Ethanol. Frisch herstellen.
• Farblösung : 1g Kristallviolett in 2ml abs. Ethanol und 8ml Chloroform lösen.
• Alkohol-Chloroform : 2ml abs. Ethanol und 8ml Chloroform
• Anilin-Chloroform : Mischung aus 4ml Anilin, 6ml Chloroform und 1ml 1%iger Essigsäure, die Mischung ist nur kurz haltbar. Ist sie trüb, muß vor Gebrauch filtriert werden.