Mikroskopische Färbemethoden
Botanik
Nachtblau-Färbung für Hefepilze
Benötigte Chemikalien :
Nachtblau (C.I.44085), Glycerin
Bemerkung :
Literatur :
MK 70, 349 (1981)
Arbeitsablauf :
- 10ml der wäßrigen Hefesuspension werden mit 1ml Glycerin versetzt.
- Die nun glycerinhaltige Hefesuspension mit 10ml Farblösung mischen und kurz umrühren.
- Mit der Verdünnungslösung auf ca. 50ml auffüllen.
- Zellen absetzen lassen (evtl. mit Hilfe einer Zentrifuge) und von der überstehenden Flüssigkeit dekantieren.
- Den Zellbodensatz mit Glycerin-Wasser I aufschlämmen und erneut absitzen lassen (min 15 Min) oder nach 15 Min abzentrifugieren.
- Punkt 5 wiederholen.
- Den Zellbodensatz mit Glycerin-Wasser II aufschlämmen und erneut absitzen lassen (min 30 Min) oder nach 30 Min abzentrifugieren.
- Einschluß einer kleinen Zellprobe in Glycerin-Gelatine nach Kaiser.
Ergebnis :
Hefezellen blau durchgefärbt.
Ansätze :
- Farblösung : 0,05g Nachtblau (Viktoriablau B) werden in einem Gemisch aus 40ml Aqua dest. und 10ml Glycerin gelöst.
evtl. etwas erwärmen.
- Verdünnungslösung : Gemisch aus 15ml Glycerin und 35ml Aqua dest.
- Glycerin-Wasser I : Gemisch aus Glycerin und Aqua dest. 1 : 1
- Glycerin-Wasser II : Gemisch aus Glycerin und Aqua dest. 3 : 1